奧林巴斯顯微鏡:萊因伯格照明系統(tǒng)的介紹
光學(xué)染色的一種形式,萊因伯格照明(Rheinberg Illumination),最初是展示皇家顯微學(xué)會(huì)和Quekett的俱樂(lè)部(英格蘭)在一百多年前由英國(guó)顯微鏡朱利葉斯萊因伯格。這種技術(shù)是一個(gè)顯著的變化,從低到中等功率暗場(chǎng)照明使用彩色明膠或玻璃過(guò)濾器提供豐富的標(biāo)本和背景顏色。
可以的萊因伯格技術(shù)相比更熟悉的暗場(chǎng)照明。在暗視野顯微鏡,臺(tái)下聚光器配置,使來(lái)自燈的光的光線,通過(guò)聚光鏡,將試樣通過(guò)只在很斜的角度。遍歷聚光鏡的光錐的中心區(qū)域是閉塞裝置,不透光的光闌直徑足夠大,以防止光線直接進(jìn)入顯微鏡物鏡。在更復(fù)雜的暗場(chǎng)聚光鏡 - 拋物面形,心形,卡塞格林或Leuchtbild - 閉塞的斜光線直射光的利用率只達(dá)到使用專門設(shè)計(jì)的鏡面。
在暗場(chǎng)照明,選擇的物鏡的數(shù)值孔徑(通過(guò)一個(gè)物鏡的的光圈或漏斗停止或減少),所以,從聚光鏡的光不能直接進(jìn)入物鏡。唯一的光線,并進(jìn)入物鏡的光的反射,折射或衍射的試樣時(shí),從聚光鏡的“一擊”試樣的傾斜射線。試樣,然后出現(xiàn)明亮否則黑場(chǎng),故名暗場(chǎng)照明。與之形成鮮明對(duì)比的黑場(chǎng)明亮的物體上增加已經(jīng)解決的細(xì)節(jié)的可視性。暗視野聚光鏡可以在圖1中的插圖來(lái)近似取代的不透光的光闌時(shí),綠色過(guò)濾器的中心,除去紅色斜光濾波器,使未經(jīng)過(guò)濾的白光通過(guò)。
位萊因伯格照明(圖1中示出),這是關(guān)系到暗視野中,數(shù)種形狀的過(guò)濾器使用。斜或外光線通過(guò)一個(gè)開(kāi)闊的明視場(chǎng)聚光鏡通過(guò)一個(gè)環(huán)形(面包圈狀)濾波器中的一種或多種顏色(顯示在圖1和圖2中的環(huán)形過(guò)濾器的紅色濾色器);中央光線的光線通過(guò)另一點(diǎn)狀的過(guò)濾器裝配到圓形開(kāi)口的環(huán)形過(guò)濾器,如在圖2中所示的幾種組合。我們的物鏡是在全開(kāi)光圈。在這種特定的情況下,試樣將顯示為綠色背景上(圖2(A)),黃藍(lán)色背景上(圖2(b)),或紅色背景上的綠色(圖2(c)是紅色) 。
制備用萊因伯格濾波器,或制造的,透明的,環(huán)形的,如圖3中所示的中央有圓形開(kāi)口的色環(huán)的形式。在這些過(guò)濾器的商業(yè)化版本中,透明色的斑點(diǎn)或“中央過(guò)濾器”附帶的一套緊貼到開(kāi)口的圓環(huán)(圖4)。中央過(guò)濾器的直徑的通過(guò)增加從外圈(圖4(交流)),單獨(dú)的過(guò)濾器的窄的黑環(huán)的尺寸,可以是多種多樣的(背景照明強(qiáng)度調(diào)制)。有效的組合,包括:紅環(huán),紫羅蘭中央過(guò)濾器;橙黃色環(huán),藍(lán)色中央過(guò)濾器,等等。其他直觀有效的圖像是由用有顏色的中央過(guò)濾器使用一個(gè)明確的未著色環(huán)。例如,一個(gè)紅色的中央過(guò)濾器會(huì)產(chǎn)生一個(gè)明確的環(huán)紅色背景上的白色或無(wú)色的圖像。
實(shí)際上,外圈“變成了”檢體的顏色和中央過(guò)濾器“變成了”背景顏色。也可以在外圈分為交替扇區(qū)的色彩,如在圖5中示出。部門的過(guò)濾器是特別有效的防翹曲的布料,晶面,硅藻,木節(jié)的長(zhǎng)度,寬度尺寸在將顯示在對(duì)比色的研究。
多年來(lái),一些顯微鏡制造商在彩色凝膠出售萊因伯格過(guò)濾(類似到柯達(dá)雷登過(guò)濾),預(yù)切,以適應(yīng)他們的顯微鏡臺(tái)下過(guò)濾環(huán)。圓環(huán)的外徑為31-35毫米,中央過(guò)濾器,通常使用具有10倍- 0.25 NA物鏡的直徑為15-18毫米。在實(shí)驗(yàn)室中使用柯達(dá)雷登過(guò)濾器或彩色過(guò)濾器被廣泛使用在科學(xué)供應(yīng) 的房子和光學(xué)元件分銷商,這些過(guò)濾器也可以很容易制作。明膠濾鏡可以通過(guò)切割中央過(guò)濾用軟木塞螟適當(dāng)?shù)闹睆剑瑘A環(huán),可以制備通過(guò)仔細(xì)地在濾紙上畫一個(gè)圓圈,用一把剪刀切割出來(lái)。在我們的實(shí)驗(yàn)室,支持機(jī)械師構(gòu)建一個(gè)的銅壓鑄削減環(huán)形濾波器的圓直徑相同我們?nèi)R因伯格過(guò)濾器支架。該模具可以迅速?gòu)拇姿峄蛎髂z彩色濾光片張郵票非常流暢界??汕懈畹沫h(huán)形濾波器的中心具有相同的軟木螟用于制備中央過(guò)濾。
有時(shí),它是困難的,提供了堅(jiān)實(shí)的環(huán)狀的過(guò)濾器殼體內(nèi)的中央過(guò)濾時(shí),這些都是非常薄的醋酸鹽或明膠濾鏡。在這種情況下,你可以只是磁帶的中心環(huán)形濾波器雙面膠帶中央過(guò)濾過(guò),但請(qǐng)記住,中央過(guò)濾器和環(huán)形濾波器的色彩會(huì)增加,所以使用一個(gè)非常黑暗的中央過(guò)濾器過(guò)濾器。中央過(guò)濾器,在一般情況下,應(yīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)比環(huán)形濾波器暗,允許標(biāo)本突出的背景形成鮮明對(duì)比的是。我們經(jīng)常放置兩個(gè)或三個(gè)相同顏色的中央過(guò)濾器堆棧中的,調(diào)整光的透射率,通過(guò)中央過(guò)濾件。萊因伯格過(guò)濾器還可以用玻璃過(guò)濾器,這是很方便的與這些過(guò)濾器的外殼時(shí),臺(tái)下聚光器安裝。在這種情況下,最好是簡(jiǎn)單的磁帶到玻璃過(guò)濾器的中心的中央過(guò)濾。對(duì)于那些有興趣在自己的過(guò)濾器,一個(gè)更完整的討論是在李約瑟的實(shí)踐使用的顯微鏡,我們的參考書目中列出。
我們比較了明、暗場(chǎng),萊因伯格照明技術(shù),使用的鹿蜱(蜱dammini),如圖6的顯微照片。第一個(gè)顯微照片(a)表示的在光照下的滴答聲。圖像的明暗對(duì)比,很多細(xì)節(jié)是很難解決的。圖6(b)示出相同的暗場(chǎng)照明下的滴答聲,存在許多虱子的功能,更高的對(duì)比度和細(xì)節(jié)是顯而易見(jiàn)的。虱子使用藍(lán)色的中央濾波器和一個(gè)黃色的圓環(huán)(參見(jiàn)圖2(b)條),導(dǎo)致增加對(duì)比度的效果,類似于暗視野萊因伯格照明(圖圖6(c)),但是,具有令人愉快的藍(lán)色背景。在這個(gè)例子中,暗場(chǎng)和萊因伯格的照明技術(shù),產(chǎn)生顯著的更好的顯微照片比明場(chǎng)。
在20世紀(jì)30年代后期,卡爾蔡司制造的一種特殊的聚光鏡,Mikropolychromar,設(shè)計(jì),生產(chǎn)美麗萊因伯格圖像。這聚光鏡生產(chǎn)出來(lái)的長(zhǎng),現(xiàn)在幾乎用不上,但它包括了齊明聚光下有三個(gè)獨(dú)立控制的隔膜。最外層的隔膜控制該字段的直徑,并且兩個(gè)較小的隔膜控制盤中央的光通過(guò)。各種顏色的環(huán)形透明環(huán)集的一部分。伴隨著這些組是一個(gè)透明的玻璃中央的磁盤漂亮地嵌合到環(huán)形圈的中央開(kāi)口。這種巧妙的聚光鏡的作者之一(M.阿布拉莫維茨)已被用于在不同的放大倍率,其中一些已經(jīng)出現(xiàn)在出版物全方位,時(shí)代生活,“科學(xué)美國(guó)人”,以及國(guó)家野生動(dòng)物保護(hù)產(chǎn)生引人注目的顯微照片。
照明萊因伯格是適合物鏡,從2倍到100倍不等。然而,為了清楚地分開(kāi)的內(nèi)和外的顏色,不透明的金屬或紙環(huán)應(yīng)放在圍繞該中心的過(guò)濾器。例如,可能具有的不透明環(huán)的外徑為10倍的物鏡為15-18毫米,和22毫米的外徑可能會(huì)對(duì)最好為60倍的油浸物鏡。這是一個(gè)很好的主意,嘗試使用類似的中央過(guò)濾器如圖4所示,以達(dá)到最佳的結(jié)果與萊因伯格照明。
為了研究纖維,原蟲(chóng),紡織品,昆蟲(chóng),木節(jié),水晶,或其他未染色的低反差的主體,顯微鏡應(yīng)考慮加入萊因伯格照明庫(kù)對(duì)比度技術(shù)。這將是可以查看和照片標(biāo)本產(chǎn)生視覺(jué)增強(qiáng)的圖像,以及外型美觀。
從作者的最后一個(gè)注意事項(xiàng):盡量顯微鏡制造商和/或獨(dú)立配件制造商,他們生產(chǎn)萊因伯格的聚光鏡和過(guò)濾器使用顯微鏡。必要的組件將非常廉價(jià)的生產(chǎn),將極大地幫助顯微鏡顯微鏡照明萊因伯格