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奧林巴斯顯微鏡，標(biāo)準(zhǔn)分辨率和性能問(wèn)題
分辨率在光學(xué)顯微鏡通常由光學(xué)單元稱為瑞利判據(jù)，它最初是制定確定的二維望遠(yuǎn)鏡的圖像分辨率的方法進(jìn)行評(píng)估，但已蔓延到在光學(xué)許多其他領(lǐng)域。瑞利準(zhǔn)則是在光從樣本生成的，并且是不依賴于用于產(chǎn)生所述圖像的放大率兩個(gè)點(diǎn)源之間的最小可分辨的距離來(lái)定義。 在一個(gè)二維圖像，兩個(gè)點(diǎn)源是可解析的，如果他們的艾里斑的衍射圖案是不同的。 根據(jù)瑞利準(zhǔn)則，兩個(gè)緊密間隔的艾里磁盤(pán)是不同的，如果他們是距離大于在其中的一個(gè)艾里斑的主
2020-09-03
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尼康顯微鏡物鏡的數(shù)值孔徑
?數(shù)值孔徑?（也稱為物方孔徑?）是一個(gè)值（通?？s寫(xiě)為NA象征）最初是由阿貝的顯微鏡物鏡和聚光鏡定義。?它由下式給出了簡(jiǎn)單的表達(dá)式：數(shù)值孔徑(NA) = n × sin(μ) or n × sin(α)注意：許多作者使用變量μ來(lái)指定一個(gè)半孔徑角，而其他使用更常見(jiàn)的術(shù)語(yǔ)α，并且在某些情況下，θ。在數(shù)值孔徑方程中，n表示物鏡前透鏡與試樣之間的介質(zhì)的折射率，μ，α是物鏡的半孔徑角。顯微鏡物鏡的數(shù)值孔徑，其
2020-09-03
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尼康顯微鏡，有效的放大倍率
?以觀察細(xì)標(biāo)本細(xì)節(jié)在光學(xué)顯微鏡下，存在的微小的功能必須有足夠的對(duì)比度和投影中間圖像間的角度是稍微大于人眼的角度分辨能力大。?在選定的數(shù)值孔徑，在顯微鏡提供的放大圖像，其具有大小等于人眼的分辨率極限，超過(guò)該點(diǎn)附加放大率不會(huì)導(dǎo)致甚至更小的樣品細(xì)節(jié)的分辨率。有效的倍率為物鏡/目鏡組合的范圍是由顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的數(shù)值孔徑來(lái)定義。?有得到解決必要的細(xì)節(jié)的最小放大率存在的圖像，并且該值通常相當(dāng)任意設(shè)置為500倍
2020-09-03
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尼康顯微鏡的圖像亮度
不論在光學(xué)顯微鏡中使用的成像模式的，圖像的亮度是由物鏡，即數(shù)值孔徑的函數(shù)的聚光功率管。 正如照明亮度被聚光的工作數(shù)值孔徑的平方確定，試樣圖像的亮度正比于物鏡的數(shù)值孔徑的平方。不像在顯微鏡的照明系統(tǒng)的情況，但是，圖像的放大倍率也起著決定圖像亮度的重要作用。事實(shí)上，圖像亮度是成反比的橫向放大率的平方：圖像亮度∝ (NA/M)2其中，NA是物鏡的數(shù)值孔徑，M為放大倍數(shù)。 公式中給出的比例高于表達(dá)了透的
2020-09-03
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尼康顯微鏡物鏡的景深和焦深
?當(dāng)考慮到在光學(xué)顯微鏡的分辨率，大部分的重點(diǎn)放在上的點(diǎn)至點(diǎn)在垂直于光軸的橫向分辨率（圖1）。?向分辨率的另一個(gè)重要方面是在軸向（或縱向）拆分的物鏡，即測(cè)量平行于光軸，并且最經(jīng)常被稱為景深的分辨能力。軸向分辨率，如水平分辨率，僅通過(guò)物鏡的數(shù)值孔徑（圖2）決定的，與目鏡僅僅放大鏡解決，投影到中間像平面的細(xì)節(jié)。?正如在傳統(tǒng)的攝影，景深是通過(guò)從在焦點(diǎn)最近的物體面到最遠(yuǎn)的平面也同時(shí)在焦點(diǎn)的距離來(lái)確定。?在現(xiàn)
2020-09-03
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![尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數(shù)]()
尼康顯微鏡：熒光蛋白的成像參數(shù)
迄今發(fā)現(xiàn)的熒光蛋白及衍生工具的廣泛用途相當(dāng)廣泛，并已成功地應(yīng)用在幾乎每一個(gè)生物學(xué)科從微生物系統(tǒng)生理學(xué)。這些獨(dú)特的探頭已經(jīng)證明是非常有用的記者在培養(yǎng)細(xì)胞和整個(gè)動(dòng)物的基因表達(dá)研究。熒光蛋白在活細(xì)胞中，最常用的跟蹤本地化和動(dòng)態(tài)的蛋白質(zhì)，細(xì)胞器，和其他細(xì)胞區(qū)室，以及細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸示蹤劑。很容易地完成了多種技術(shù)，其中包括尼康顯微鏡，寬視場(chǎng)，共聚焦和多光子顯微鏡，熒光蛋白的定量成像曝光細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的復(fù)雜性
2020-09-03
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![尼康顯微鏡：反射（落射）光照明]()
尼康顯微鏡：反射（落射）光照明
也許最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，這適用于所有形式的光學(xué)顯微鏡觀察標(biāo)本的照明和感興趣的特點(diǎn)，揭示其有效性的方法。往往利用體視顯微鏡下檢查標(biāo)本反映（落射）和透射（透射）照明計(jì)劃，采用多種光源和配置在適當(dāng)?shù)奈恢?，這是戰(zhàn)略定位。在很多情況下，反射和透射的光源相結(jié)合，以利用特定試樣的特性，更有效地揭示了感興趣的特征的方式。這次審查的重點(diǎn)各種各樣的技術(shù)和設(shè)備，目前在使用中，照亮了眾多的標(biāo)本觀察反射光技術(shù)。許多用體視顯微鏡標(biāo)
2020-09-03
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![奧林巴斯顯微鏡：熒光顯微鏡攝影的錯(cuò)誤]()
奧林巴斯顯微鏡：熒光顯微鏡攝影的錯(cuò)誤
顯微攝影在熒光照明條件下，提出了一套獨(dú)特冒充顯微鏡的特殊問(wèn)題的情況。曝光時(shí)間往往是非常長(zhǎng)的（在某些情況下運(yùn)行多少秒到幾分鐘），試樣的熒光可能會(huì)在曝光過(guò)程中褪色，全黑的背景往往在不經(jīng)意間光信號(hào)米建議過(guò)度曝光。此外，熒光的標(biāo)本發(fā)出他們自己的光，和顆粒位于所需的焦點(diǎn)平面的上方和下方往往輻射光造成圖像細(xì)節(jié)模糊。盡管熒光圖像可能會(huì)顯得明亮?xí)r，通過(guò)顯微鏡目鏡（由于人眼對(duì)光線的敏感度的精致），它們通常需要較長(zhǎng)的
2020-09-03
